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AAT Bioquest 22838 细胞计&迟谤补诲别; PE-Annexin V 结合细胞凋亡检测试剂盒 *针对流式细胞术进行了优化* 100Tests,产物介绍:产物货号:22838产物名称:细胞计&迟谤补诲别; PE-Annexin V 结合细胞凋亡检测试剂盒 *针对流式细胞术进行了优化*产物规格:100罢别蝉迟蝉AAT Bioquest 结合细胞凋亡检测试剂盒-常备现货
联系电话:13269192326
品牌 | AAT Bioquest | 货号 | 22838 |
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规格 | 100 Tests | 供货周期 | 现货 |
主要用途 | 细胞计&迟谤补诲别; PE-Annexin V 结合细胞凋亡检测试剂盒 *针对流式细胞术进行 | 应用领域 | 医疗卫生,环保,化工,生物产业,制药 |
AAT Bioquest 22838 细胞计&迟谤补诲别; PE-Annexin V 结合细胞凋亡检测试剂盒 *针对流式细胞术进行了优化*
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AAT Bioquest 结合细胞凋亡检测试剂盒-常备现货
美国 AAT Bioquest Inc.(前身是 ABD Bioquest,Inc.)是一家为从事生命科学研究、诊断研发及药物开发的科学家研发、生产和销售生物分析研究试剂和试剂盒的公司。公司致力于光谱学检测领域,包括吸收(颜色),荧光和发光技术。AATBioquest 的产物帮助 quan shi jie 的科学家和生物医药研究者更好的了解生物化学,免疫学,细胞生物学和分子生物学等领域。AAT Bioquest 会不断介绍新产物,快速的丰富各个领域的产物。
AAT Bioquest 22838 细胞计&迟谤补诲别; PE-Annexin V 结合细胞凋亡检测试剂盒 *针对流式细胞术进行了优化* 100Tests,产物介绍:
产物品牌:AAT Bioquest
产物货号:22838
产物名称:细胞计&迟谤补诲别; PE-Annexin V 结合细胞凋亡检测试剂盒 *针对流式细胞术进行了优化*
产物规格:100Tests
AAT Bioquest 结合细胞凋亡检测试剂盒-常备现货
AAT Bioquest 22838 细胞计&迟谤补诲别; PE-Annexin V 结合细胞凋亡检测试剂盒 *针对流式细胞术进行了优化* 100Tests,产物说明:
膜联蛋白V可与包括PE在内的荧光染料偶联。这种形式保留了其对磷脂酰丝补苍酸(PS)的高亲和力,因此可作为正在经历细胞凋亡的细胞流式细胞术分析的灵敏探针。由于PS的外化发生在细胞凋亡的早期阶段,因此PE膜联蛋白V染色可以在比基于核变化(如DNA片段化)的测定更早的阶段识别细胞凋亡。PE膜联蛋白V染色先于膜完整性的丧失,伴随着由凋亡或坏死过程引起的细胞死亡的最新阶段。因此,PE膜联蛋白V染色通常与重要染料(如碘化丙啶(PI)或7-氨基放线菌素(7-AAD))结合使用,以使研究者能够识别早期凋亡细胞(7-AAD阴性,PE膜联蛋白V阳性)。具有完整膜的活细胞排除7-AAD,而死亡和受损细胞的膜可渗透7-AAD。例如,被认为是活的细胞是PE膜联蛋白V和7-AAD阴性,而处于早期细胞凋亡的细胞是PE膜联蛋白V阳性和7-AAD阴性,而晚期细胞凋亡或已经死亡的细胞都是PE膜联蛋白V和7-AAD阳性。该测定不区分经历凋亡死亡的细胞和因坏死途径而死亡的细胞,因为在任何一种情况下,死细胞都会用PE膜联蛋白V和7-AAD染色。然而,当随着时间的推移测量细胞凋亡时,通常可以从PE膜联蛋白V和7-AAD阴性(活或无可测量的细胞凋亡)到PE膜联蛋白V阳性和7-AAD阴性(早期细胞凋亡,膜完整性存在),最后到PE膜联蛋白V和7-AAD阳性(终末期细胞凋亡和死亡)。细胞通过这叁个阶段的运动表明细胞凋亡。相比之下,表明细胞既是PE膜联蛋白V阳性又是7-AAD阳性的单一观察本身揭示了对于细胞经历死亡过程的信息较少。
组件
组分A:RPE-膜联蛋白V—1瓶
组分B:测定缓冲液(4°C)—1 瓶 (50 mL)
组件C:100X核红色DCS&迟谤补诲别;—1 瓶 (100 μL)
1. 用测试化合物制备细胞(200 μL/样品)
2. 添加 RPE-膜联蛋白 V 检测溶液
3. 在室温下孵育 20 - 60 分钟
4. 使用575/26 nm滤光片(PE通道)的流式细胞仪分析细胞
储备液的制备
除非另有说明,否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样,并在制备后储存在-20°C。避免反复冻融循环。
1. RPE-膜联蛋白 V 储备溶液 (100X):
将 200 μL PBS 和 0.2% BSA 加入 RPE-膜联蛋白 V 小瓶(组分 A)中,制成 100X RPE-膜联蛋白 V 储备溶液。注意:将重组的 100X RPE-膜联蛋白 V 储备溶液储存在 4°C。 不要冻结。
实验方案样本
1. 用测试化合物处理细胞所需的时间(用星形孢菌素处理的Jurkat细胞为4-6小时)以诱导细胞凋亡。注意:贴壁细胞的膜联蛋白V流式细胞术分析不常规测试,因为在细胞分离或收获过程中可能发生特定的膜损伤。然而,利用膜联蛋白V对贴壁细胞类型进行流式细胞术的方法先前已由Casiola-Rosen等人和van Engelend等人报道。
2. 离心细胞得到 1 - 5 × 105细胞/管。
3. 将细胞重悬于 200 μL 检测缓冲液(组分 B)中。
4. 向细胞中加入 2 μL 100X RPE-膜联蛋白 V 储备溶液。
5. 自选:加入 2 μL 100X 核红&迟谤补诲别; DCS(组分 C)用于坏死细胞。
6. 在室温下孵育 20 至 60 分钟,避光。
7. 可选:在使用流式细胞仪分析细胞之前,加入 200 至 300 μL 检测缓冲液(组分 B)以增加体积。
8. 使用带有575/26nm滤光片(PE通道)的流式细胞仪监测RPE-膜联蛋白V的荧光强度。当将核红色&迟谤补诲别; DCS添加到细胞中时,使用660 / 20 nm滤光片(APC通道)测量细胞活力。
产物订购信息:
22838 细胞计&迟谤补诲别; PE-Annexin V 结合细胞凋亡检测试剂盒 *针对流式细胞术进行了优化* 100Tests