品牌 AAT Bioquest 货号 15273/15274 规格 250 Tests 供货周期 现货 主要用途 础尘辫濒颈迟别&谤别驳;比色狈础顿/狈础顿贬（狈础顿笔/狈础顿笔贬）比值测定试剂盒 应用领域 医疗卫生,环保,化工,生物产业,制药
AAT Bioquest 15273/15274 Amplite® 比色NAD/NADH （NADP/NADPH ）比值测定试剂盒
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AAT Bioquest 比值测定试剂盒-常备现货
美国AAT Bioquest Inc.( 前身是ABD Bioquest ，Inc.) 是一家为从事生命科学研究、诊断研发及药物开发的科学家研发、生产和销售生物分析研究试剂和试剂盒的公司。公司致力于光谱学检测领域，包括吸收（颜色），荧光和发光技术。AAT Bioquest 的产物帮助 quan 世 jie 的科学家和生物医药研究者更好的了解生物化学，免疫学，细胞生物学和分子生物学等领域。AAT Bioquest 会不断介绍新产物，快速的丰富各个领域的产物。
AAT Bioquest 15273 Amplite® 比色 NAD/NADH 比值检测试剂盒 250 Tests
AAT Bioquest 15274 Amplite® 比色法 NADP/NADPH 比值检测试剂盒 250 Tests
AAT Bioquest 比值测定试剂盒-常备现货
AAT Bioquest 15273 Amplite® 比色 NAD/NADH 比值检测试剂盒 250 Tests
烟xian 胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+ ）和烟xian 胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADP+ ）是细胞中发现的两种重要的辅助因子。NADH 是NAD + 的还原形式，NAD + 是NADH 的氧化形式。它通过酯键将磷酸基团添加到腺苷核苷酸的 2' 位置以形成 NADP 。NADP 用于合成代谢生物反应，如脂肪酸和核酸合成，需要NADPH 作为还原剂。传统的NAD / NADH 和NADP / NADPH 测定是通过监测340nm 处的NADH 或NADPH 吸收来完成的。该方法灵敏度低，干扰高，因为测定是在需要昂贵的石英微孔板的紫外范围内进行的。我们的 Amplite® NAD/NADH 比率检测试剂盒为灵敏检测 NAD 、NADH 及其比率提供了一种方便的方法。NADH 探针是一种显色传感器，在NADH 还原时在~460nm 处具有最大吸光度。~460nm 处的吸光度增加与溶液中NADH 的浓度成正比。NADH 探针可以在无酶反应中识别NADH ，并且吸光度酶标仪可以在~460nm 处轻松读取信号。Amplite® 比色 NADH 检测试剂盒提供灵敏的检测方法，可在 3 μL 检测体积中检测低至 100 μM NADH 。该测定可以以方便的 96 孔或 384 孔微量滴定板形式进行。
平台
吸光度酶标仪
吸光度 460 纳米
推荐板 清除底部
组件
组分A ：NAD/NADH 回收酶混合物 2
组件 B-I ：NADH 探头 1 4 mL ）
组件 B-II ：NADH 探针缓冲液 1 16 mL ）
组件C ：NADH 标准（FW ：709 ） 1 142 μg ）
组分D ：NAD 提取溶液 1 10 mL ）
组分E ：中和溶液 1 10 mL ）
组件F ：提取控制解决方案 1 瓶 （10 mL ）
组分G ：裂解缓冲液 1 10 mL ）
一目了然
协议摘要
1. 准备 25 μL NADH 标准品和/ 或测试样品
2. 加入 25 μL NAD 提取溶液
3. 37 岁孵化oC 15 分钟
4. 加入 25 μL 中和溶液
5. 加入 75 μL NAD/NADH 工作溶液
6. 在室温下孵育 15 分钟至 2 小时
7. 监测 460 nm 处的吸光度
重要说明
强烈建议在37 °C 下用裂解缓冲液（组分G ）孵育细胞，并使用上清液进行实验。
在开始实验之前，在室温下解冻每种试剂盒组分之一。
储备溶液的制备
除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20 °C 。避免反复冻融循环
NADH 标准溶液 （1 mM ）
将 200 μL 1X PBS 缓冲液加入 NADH 标准品（组分 C ）小瓶中，制成 1 mM （1 nmol/ μL ） NADH 标准溶液。
标准溶液的制备
NADH 标准
将 50 μL 1 mM （1 nmol/ μL ） NADH 标准溶液加入 450 μL 1X PBS 缓冲液 （pH 7.4 ） 中，生成 100 μM （100 pmols/ μL ） NADH 标准溶液。然后取100 μM NADH 标准溶液，在1X PBS 缓冲液中进行2 ：1 连续稀释，以获得连续稀释的NADH 标准品（NS1 - NS7 ）。注意：稀释的NADH 标准溶液不稳定，应在4 小时内使用。
工作溶液的制备
将 8 mL NADH 探针缓冲液（组分 B-II ）加入 NAD/NADH 回收酶混合物（组分 A ）瓶中，并充分混合。
将 2 mL NADH 探针（组分 B-I ）加入组件 A+B-II 的瓶中，充分混合制成 NAD/NADH 工作溶液。
注意 这种NAD / NADH 工作溶液足以进行125-200 次测定。工作溶液不稳定，及时使用，避免直接暴露在光线下。
注意 可以尝试使用ddH 2 O （例如500 uL ）溶解组分A ，然后按比例与B-II 和B-I 混合，以使NAD / NADH 工作溶液仅供充分使用。
AAT Bioquest 15274 Amplite® 比色法 NADP/NADPH 比值检测试剂盒 250 Tests
烟xian 胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+ ）和烟xian 胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADP+ ）是细胞中发现的两种重要的辅助因子。NADH 是NAD + 的还原形式，NAD + 是NADH 的氧化形式。它通过酯键将磷酸基团添加到腺苷核苷酸的 2' 位置以形成 NADP 。NADP 用于合成代谢生物反应，如脂肪酸和核酸合成，需要NADPH 作为还原剂。传统的NAD / NADH 和NADP / NADPH 测定是通过监测340nm 处的NADH 或NADPH 吸收来完成的。该方法灵敏度低，干扰高，因为测定是在需要昂贵的石英微孔板的紫外范围内进行的。我们的 Amplite® NADP/NADPH 比率检测试剂盒为灵敏检测 NADP 、NADPH 及其比率提供了一种方便的方法。NADPH 探针是一种显色传感器，在NADH 还原时在~460nm 处具有最大吸光度。~460nm 处的吸光度增加与溶液中NADPH 的浓度成正比。NADPH 探针可以在无酶反应中识别NADPH ，并且吸光度酶标仪可以在~460nm 处轻松读取信号。Amplite® 比色法 NADPH 检测试剂盒提供灵敏的检测方法，可在 3 μL 检测体积中检测低至 100 μM NADPH 。该测定可以以方便的 96 孔或 384 孔微量滴定板形式进行。
平台
吸光度酶标仪
吸光度 460 纳米
推荐板 清除底部
组件
组分A ：NADP / NADPH 回收酶混合物 2
组件 B-I ：NADPH 探头 1 4 mL ）
组分 B-II ：NADPH 探针缓冲液 1 16 mL ）
组件C ：NADPH 标准 1 瓶 （167 μg ）
组分D ：NADP 提取液 1 瓶 （10 mL ）
组分E ：中和溶液 1 10 mL ）
组件F ：提取控制解决方案 1 瓶 （10 mL ）
组分G ：裂解缓冲液 1 10 mL ）
1. 准备 25 μL NADPH 标准品和/ 或测试样品
2. 加入 25 μL NADP 提取溶液
3. 在37 °C 孵育15 分钟
4. 加入 25 μL 中和溶液
5. 加入 75 μL NADP/NADPH 工作溶液
6. 在室温下孵育 15 分钟至 2 小时
7. 监测 460 nm 处的吸光度
重要说明
强烈建议在37 °C 下用裂解缓冲液（组分G ）孵育细胞，并使用上清液进行实验。
在开始实验之前，在室温下解冻每种试剂盒组分之一。
储备溶液的制备
除非另有说明，否则所有未使用的储备溶液应分成一次性等分试样，并在制备后储存在-20 °C 。避免反复冻融循环
NADPH 标准溶液 （1 mM ）
将 200 μL PBS 缓冲液加入 NADPH 标准品（组分 C ）的小瓶中，以获得 1 mM （1 nmol/ μL ） NADPH 储备溶液。
标准溶液的制备
NADPH 标准
将 10 μL 1 mM NADPH 储备溶液加入 490 μL PBS 缓冲液 （pH 7.4 ） 中，生成 20 μM （20 pmols/ μL ） NADPH 标准溶液。然后取20 μM NADPH 标准溶液并进行1 ：2 系列稀释，以获得剩余的连续稀释NADPH 标准品（NS7 - NS1 ）。注意：稀释的NADPH 标准溶液不稳定，应在4 小时内使用。
工作溶液的制备
1. 将 8 mL NADPH 探针缓冲液（组分 B-II ）加入 NADP/NADPH 回收酶混合物（组分 A ）瓶中，并充分混合。
2. 将 2 mL NADPH 探针（组分 B-I ）加入同一瓶中（来自步骤 1 ）并充分混合。
注意此NADP / NADPH 工作溶液足以进行125-200 次测定。工作溶液不稳定，及时使用，避免直接暴露在光线下。
产物订购信息：
AAT Bioquest 15273 Amplite® 比色 NAD/NADH 比值检测试剂盒 250 Tests
AAT Bioquest 15274 Amplite® 比色法 NADP/NADPH 比值检测试剂盒 250 Tests
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